使用超声引导的牛卵母细胞抽吸和 IVF(体外授精) 程序确实为养牛者提供了一种替代方案,这些养牛者拥有具有遗传价值的奶牛,但由于某种原因无法通过标准胚胎收集程序生产出可存活的胚胎。该技术可用于从老龄排卵或不排卵奶牛、身体受伤的母牛(例如腿部骨折)和子宫颈异常的问题奶牛身上采集的卵母细胞。
在 IVF 的帮助下,如果每头奶牛每月可以重复 3 至 4 次或更多次该方法,则可以在更短的时间内生产更多的胚胎。
牛用活体采卵仪引导取卵方法也可用于青春期前动物、怀孕动物和用于胚胎生产的外来动物。辅助生殖技术将使生产者能够在家畜中不断取得遗传进步。一个成功的案例是人工授精 (AI),使用用于 AI 的冷冻精液改进牛奶生产的遗传选择和改进的畜群管理极大地改变了乳制品行业。
早期从潜在供体牛身上提取卵母细胞的尝试包括外科手术和侵入性较小的腹腔镜手术,但在不对供体动物造成伤害的情况下可以安全地进行多少次手术是有限制的。 在这个阶段,基本上没有安全、可重复的方法从活的农场动物身上采集卵母细胞。可以从单个卵泡中吸出新鲜卵母细胞并进行体外成熟、体外受精,然后进行体外培养程序。 这些努力为开发从活牛身上获取卵母细胞的新生殖技术铺平了道路。然后评估了这种方法从成熟的肉牛和奶牛以及年轻的周期小母牛身上收获卵母细胞的效率。
为了获取用于 IVF 的卵母细胞,训练有素的专业人员将超声引导的不锈钢针插入子宫颈附近的阴道壁,以从超声检查检测到的卵泡中提取卵母细胞。 抽吸手术通常在供体女性卵巢上的小、中和大卵泡上进行。 目前,经阴道超声引导的卵母细胞抽吸 (TUGA),在人类医学中也称为取卵 (OPU),目前正在对奶牛、母马和山羊进行进一步评估。 ***近,正在为猪、家养绵羊和外来蹄类动物开发 TUGA。
牛。 在牛中,供体雌性被限制在合适的保持槽中并进行硬膜外阻滞。 使用专用的opu活体采卵探头,进行超声波引导采卵。牛卵泡在监视器屏幕上被识别为黑色(低回声)圆形。 一根 18 号、550 或 600 毫米长的针头穿过塑料手柄中的针头导向器插入。 该针头通过聚乙烯管连接到抽吸泵,穿过胚胎过滤器或进入 50 毫升圆锥形试管,用于收集含有卵母细胞的卵泡液。 用于此过程的冲洗介质是磷酸盐缓冲盐水 (PBS),其中含有 10% 的牛血清、抗生素和肝素。 使用这种抽吸方法,60% 到 70% 的中型到大型卵泡被刺破,导致卵母细胞恢复,每个未受刺激的供体雌性平均有 3 到 10 个卵母细胞。